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    HE染色實驗的詳細實驗步驟是什么?

    發(fā)布時間: 2020-12-11  點擊次數(shù): 2201次
       HE染色實驗簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質與胞質內(nèi)的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中zui基本、使用zui廣泛的技術方法。
      易于被堿性或酸性染料著色的性質稱為嗜堿性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性(neutrophilia)。
      構成組織內(nèi)蛋白質的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細胞內(nèi)的酸性物質如細胞核的染色質、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質網(wǎng)及透明軟骨基質等均被堿性染料染色,這些物質稱為嗜堿性。而細胞質中的其它蛋白質如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。

    HE染色實驗

      HE染色實驗的步驟:
      1,石蠟切片脫蠟至水依次將切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。
      2,蘇木素染細胞核
      切片入Harris蘇木素染3-8min,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,0.6%氨水返藍,流水沖洗。
      3,伊紅染細胞質
      切片入伊紅染液中染色1-3min。
      4,脫水封片
      將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無水乙醇Ⅰ5min -無水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來稍晾干,中性樹膠封片。
      5,顯微鏡鏡檢,圖像采集分析
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