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    HE染色實(shí)驗(yàn)時(shí)需要注意什么?

    發(fā)布時(shí)間: 2021-03-29  點(diǎn)擊次數(shù): 1960次
       HE染色實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中zui基本、使用zui廣泛的技術(shù)方法。
      HE染色實(shí)驗(yàn)步驟:一般包含取材固定,脫水透明,浸蠟包埋,切片與貼片,脫蠟染色,脫水透明,封固等步驟。
      HE染色實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng):
      1、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長(zhǎng),組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此,要在自來水中沖洗時(shí)間長(zhǎng)一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
      2、切片染蘇木精后,分色這一步是關(guān)鍵,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長(zhǎng)分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺,應(yīng)重新染色后再行分色。
      3、切片經(jīng)酒精脫水后,入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),此為脫水不*,應(yīng)將切片退回*,更換酒精、二甲苯,以求*脫水與透明。
      4、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮、變形,影響神經(jīng)元形態(tài)。
      5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。
      6、zui后封固時(shí),要用中性樹脂,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,如漏出一部分不久將會(huì)褪色,所用樹脂濃度要適當(dāng),樹脂封固時(shí)不能有氣泡。
     
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