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DNA提取技術服務是怎樣子的呢？
發(fā)布時間： 2022-05-29 點擊次數： 1485次DNA提取技術服務是一種使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母細胞壁，然后采用一種新型的酵母質粒純化柱實現從酵母細胞中進行小量質粒快速抽提的試劑盒。1、無需酚氯仿抽提，無需酒精沉淀，12個樣品只需約1-1.5小時即可完成。2、試劑盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除細胞壁，接著采用傳3統(tǒng)堿裂法裂解細胞，然后將獲得的上清液轉移至結合柱結合DNA，經過離心快速洗滌，最后用洗脫液洗脫出酵母質粒DNA。3、由于采用了高濃度的破壁酶，無需再使用玻璃珠，可以避免因為玻璃珠的機械作用帶來的酵母基因組DNA污染。DNA提取技術服務本實驗方法的基本原理是，在高鹽狀態(tài)下，硅膠膜專一性地吸附DNA；而在低鹽或水溶液狀態(tài)下，DNA被洗脫下來。此法簡便快捷，可在30分鐘內同時提純二十多個樣品。從3～5ml培養(yǎng)過夜的含高拷貝質粒的菌液中可以獲得10～20μg高純度的質粒DNA，用于酶切、轉化、DNA自動測序和手工測序等。DNA提取技術服務純化柱可以結合的質粒量的上限約為20微克。質粒DNA的產量依賴于酵母攜帶質粒的拷貝數，酵母菌株以及生長條件。通常酵母質粒的拷貝數較低，1.5-5ml培養(yǎng)過夜的酵母抽提獲得的質粒DNA量約為1-3微克左右。高拷貝酵母質粒抽提時的得率會大大提高。抽提所得質粒的量與酵母培養(yǎng)濃度、質?？截悢怠⒔湍钙废档纫蛩赜嘘P。
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