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凋亡的形態(tài)學(xué)特征

時間:2023/7/25閱讀:208
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發(fā)生凋亡的細胞,其表面的微絨毛消失,并逐步脫離與周圍細胞的接觸。形態(tài)上,凋亡細胞首先變圓,與鄰近細胞脫離,失去微絨毛,胞質(zhì)脫水濃縮,胞膜迅速發(fā)生空泡化(bleb-bing),細胞體積逐漸縮小,出現(xiàn)固縮(condensation),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張呈泡狀并與細胞膜融合,形成膜表面的芽狀突起,稱為出芽(buding)。晚期,核染色質(zhì)高度濃縮融合成團狀,核染色質(zhì)密度增高呈半月形或馬蹄形分布,并凝集在核膜周邊,稱為染色質(zhì)邊集(margination)。核仁裂解,進而胞膜皺縮內(nèi)陷,自行分割為多個外部有膜包裹的、內(nèi)含物不外泄的泡狀小體,稱為凋亡小體(apoptosis body),最終被鄰近細胞所識別、吞噬消化,或自然脫落而離開生物體。

7.12凋亡的形態(tài)學(xué)特征.png

DNA迅速被核酶所降解,產(chǎn)生若干個大小不同的寡核苷酸碎片,在瓊脂糖凝膠電泳上呈現(xiàn)階梯狀核蛋白區(qū)帶圖譜。由于酶切的位點在核小體處,而核小體的核苷酸為180bp,所以產(chǎn)生不同倍數(shù)的180~200個堿基對的核酸片段電泳區(qū)帶。但在整個過程中,線粒體內(nèi)的 DNA并不發(fā)生斷裂。

由于這種死亡過程沒有溶酶體酶及胞膜破裂,所以,細胞內(nèi)涵物不外泄。近年來的研究發(fā)現(xiàn),凋亡細胞表面有糖蛋白的末端唾液酸殘基發(fā)生丟失,膜磷脂層不對稱性被破壞﹑磷脂酰絲-氨-酸暴露等改變,均可以促使吞噬細胞對凋亡細胞的識別,凋亡時常常無炎癥反應(yīng)也正是因為這個緣故,因此長期以來凋亡一直未引起人們的重視。

通過流式細胞儀等方法觀察發(fā)現(xiàn),凋亡與死亡有明顯的差異(表21-1),凋亡細胞具有以下特征:①由于細胞核酸內(nèi)切酶激活,使DNA特征性熒光染色減少。②細胞質(zhì)膜保持一定的完整性。③線粒體跨膜電位下降。④保留ATP依賴的溶酶體質(zhì)子泵。⑤細胞蛋白含量明顯減少,系由內(nèi)源性蛋白酶被激活,蛋白質(zhì)酶解增加所致.⑥在胸腺細胞,凋亡發(fā)生在G。期。⑦光吸收減少,直角散射不變(HL-60細胞)或增加(胸腺細胞)。

7.12圖片1.png

細胞凋亡的發(fā)展包括兩個不同時期:

1)致死前期(prelethal stage):是凋亡時細胞損傷的早期,具有可逆性,此時出現(xiàn)細胞皺縮、核染色質(zhì)固縮、胞質(zhì)中含空泡等變化,最后出現(xiàn)線粒體腫脹。

2)致死期(lethal stage):凋亡細胞進入死亡階段,此時變化不可逆,出現(xiàn)質(zhì)膜連續(xù)性破壞和染色質(zhì)嚴(yán)重固縮、融化及腫脹的線粒體中絮狀集結(jié)和(或)鈣化。這常常見于脫落的凋亡細胞中,或吞噬了致死前期空泡片段的鄰近細胞的溶酶體中。

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