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F10301 mouse sCD40L ELISA試劑盒 48T/96T1800/2800進口分裝
F10301 mouse sCD40L ELISA試劑盒 48T/96T 1800/2800 進口分裝
F10301 mouse sCD40L ELISA試劑盒 48T/96T 1800/2800 進口分裝
F10301 mouse sCD40L ELISA試劑盒 48T/96T 1800/2800 進口分裝
| 免疫印跡（western blot）技術(shù)服務(wù) | |||
| ◇樣本制備 | |||
| 1. 懸浮細胞：取大約 1×107個細胞，低速離心收集，棄去培養(yǎng)液，加入1ml PBS懸浮細胞，轉(zhuǎn)入小離心管中，低 | |||
| 速離心沉淀細胞，棄去PBS，放入-70℃ 冰箱保存。 | |||
| 2. 貼壁細胞：取大約1×107個貼壁細胞，*消化后加入PBS懸浮細胞，轉(zhuǎn)入小離心管中，低速離心沉淀細胞， | |||
| 棄去PBS，放入-70℃ 冰箱保存。 | |||
| 3. 組織：采集新鮮組織（注意：生物體死亡后10分鐘內(nèi)取材料并保存好），組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈， | |||
| 切成小塊，放入-70℃冰箱中保存。 | |||
| 樣本量：組織樣本，質(zhì)量大于100mg；細胞樣本，細胞數(shù)大于1×106； | |||
| ◇蛋白質(zhì)抽提： | |||
| 實驗對象為組織樣品，取適量（250~500mg）新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，加1ml含蛋白酶抑制劑的總 | |||
| 蛋白抽提試劑（或核蛋白抽提試劑），勻漿后抽提總蛋白（或核蛋白）。實驗對象為細胞樣品（細胞培養(yǎng)），每 | |||
| 份樣品取1×106～1×107細胞，PBS清洗細胞，去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑（或核蛋白 | |||
| 抽提試劑）抽提總蛋白（或核蛋白）。標本也可交給我們處理，組織標本每個10元，核蛋白或膜蛋白I（細胞樣本） | |||
| 每個30元。 | |||
| ELISA試劑盒免費代測服務(wù) | |||
| ◇血清： | |||
| 室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 | |||
| ◇血漿： | |||
| 應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% | |||
| heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。如有沉淀形 | |||
| ◇細胞培養(yǎng)上清： | |||
| 檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的 | |||
| 成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放 | |||
| 出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 | |||
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