移動(dòng)端
直播推薦
回放
回放
脈沖場(chǎng)凝膠電泳是近年發(fā)展起來的分離效果較好的DNA分離方法，可以有效分離50kb甚至10Mb的DNA大片段。因此脈沖電泳儀已經(jīng)成為DNA分離的主要儀器。脈沖電泳儀的使用條件對(duì)DNA分離速度與效果有很大影響，主要包括以下幾點(diǎn)：
1.電泳緩沖液
在脈沖電泳時(shí)常使用的電泳緩沖液有三種，不同緩沖液的離子強(qiáng)度不同，電泳速度也不同。
2.瓊脂糖種類及濃度
瓊脂糖種類對(duì)脈沖場(chǎng)電泳雖然影響不是甚大,但也有一定程度影響。低電滲(EEO)的瓊脂糖使電泳速度加快。有條件的情況下，使用超純瓊脂糖可產(chǎn)生較好的分離效果。凝膠的濃度太低，使泳動(dòng)速度加快，不利于較小或中等長(zhǎng)度DNA片段的分離。膠的濃度太大，則影響大分子DNA的分離。因此要根據(jù)具體情況，選用不同濃度的膠。在一-般情況下，常采用的凝膠濃度為1～1.4%。
3.電壓
6～10伏特/cm的電壓梯度?？墒箮资甼b到1000kb的DNA片段得到有效分離。如果想分離更長(zhǎng)的DNA片段，則應(yīng)適當(dāng)降低電壓梯度。
4.變換電場(chǎng)方向的時(shí)間間隔
開關(guān)(即變換電場(chǎng)方向)的時(shí)間間隔對(duì)電泳效果影響較大。DNA在泳動(dòng)過程中再定向所需的時(shí)間和DNA的大小呈正相關(guān)，因此較大的DNA分子需要較長(zhǎng)的開關(guān)時(shí)間間隔。在確定了開關(guān)時(shí)間間隔的情況下，小于一定尺寸的DNA分子能夠隨著電場(chǎng)方向的變化再定向并在新電場(chǎng)影響下泳動(dòng)，而大于一定尺寸的DNA分子在再定向尚未完成時(shí)便發(fā)生了開關(guān)的再次變化，因此不能泳動(dòng)和得到有效分離。
5.溫度
電泳時(shí)通過循環(huán)裝置使緩沖液保持恒定是重要的。溫度的高低對(duì)電泳速度也有重要影響。
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
浙公網(wǎng)安備 33010602002722號(hào)
2025廣州國(guó)際分析測(cè)試及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備展覽會(huì)暨技術(shù)研討會(huì)
展會(huì)城市：廣州市展會(huì)時(shí)間：2025-03-05