血細(xì)胞分析儀是醫(yī)院臨床檢驗(yàn)應(yīng)用非常廣泛的儀器之一,隨著近幾年計(jì)算機(jī)技術(shù)的日新月異的發(fā)展,血細(xì)胞分析的技術(shù)也從三分群轉(zhuǎn)向五分群,從二維空間進(jìn)而轉(zhuǎn)向三維空間。20試劑90年代以來,隨著各種技術(shù)的在血細(xì)胞分析儀中的應(yīng)用,使其檢測原理不斷完善,檢測水平也不斷提高。血細(xì)胞分析儀的主要檢測原理有:
一、電阻抗法白細(xì)胞技術(shù)和分類原理
電阻抗法白細(xì)胞技術(shù)原理時根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì),u以對電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒在通過技術(shù)小孔時引起的電阻變化進(jìn)行檢測為基礎(chǔ),進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測定。
二、電阻抗法紅細(xì)胞檢測原理
電阻抗法紅細(xì)胞檢測原理可分為三個部分,紅細(xì)胞技術(shù)和紅細(xì)胞比例容測定原理、血紅蛋白測定原理、各項(xiàng)紅細(xì)胞指數(shù)的檢測原理。此項(xiàng)原理可以對紅細(xì)胞進(jìn)行全面的檢測,可以檢測單個細(xì)胞體積及相同體積細(xì)胞占總體的比例 ,是否貧血等等。
三、光散射法紅細(xì)胞檢測原理
全血與紅細(xì)胞/ *混合 ,使自然狀態(tài)下雙凹盤狀扁平圓形的紅細(xì)胞成為球形并經(jīng)戊二醛固定(RBC 體積不變) 。使得紅細(xì)胞無論以何種方位通過測量區(qū)時 ,被激光束照射后所得的信號是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同時測量一個紅細(xì)胞 ,根據(jù)低角度光散射轉(zhuǎn)換能量大小 ,測量單個紅細(xì)胞體積與總數(shù) ;根據(jù)高角度光散射得出單個紅·細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白濃度 ,測量數(shù)據(jù)經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后得出 RBC、MCV 和 HCT 等參數(shù)值。
四、光散射法血小板檢測原理
根據(jù)同質(zhì)性球體光散射的 Mie 理論 ,當(dāng)球形化的血小板單個通過激光照射區(qū)時 ,儀器在兩個角度測定激光的散射強(qiáng)度 :高角度主要測細(xì)胞的折射指數(shù) (RI) ,它與細(xì)胞的密度有關(guān) ;低角度主要測細(xì)胞體積的大小。
血細(xì)胞分析儀注意事項(xiàng)
1.由于靜脈血受外界因素影響較小,成份比較穩(wěn)定,檢測結(jié)果準(zhǔn)確度高重復(fù)性好,因此除嬰兒外,建議取血者均應(yīng)采用靜脈血。如果采集未梢血時,不可局部過度擠壓,避免血液中混入大量的組織液,而且易激活凝血系統(tǒng)產(chǎn)生局部凝血,導(dǎo)致檢測結(jié)果的誤差。第一滴血由于細(xì)胞成分不穩(wěn)定應(yīng)棄掉,用第二滴血進(jìn)行檢測。
2.使用拘櫞酸鹽抗凝劑時間過長易結(jié)晶,細(xì)胞形態(tài)易發(fā)生變化,影響計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。草酸鹽易使血小板產(chǎn)生凝集,并可使白細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,影響計(jì)數(shù)結(jié)果及分類。而肝素抗凝過量易引起白細(xì)胞凝集和血小板減少,EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(ICSH)1993年發(fā)表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細(xì)胞分析儀的抗凝劑,用量為1.5~2.2mg/ml血。
3.采血后用塞子密閉,室溫保存不超過6小時。
4.稀釋器、吸樣管要經(jīng)過校準(zhǔn)。吸血后吸樣管外的血液要*擦干凈。血液稀釋后要盡快測定,否則易引起“稀釋性溶血”。
5.檢測前混勻很重要,如果無旋轉(zhuǎn)式混勻器應(yīng)顛倒混勻至少8次。
6.血細(xì)胞分析儀對試劑的要求非常嚴(yán)格,要求有嚴(yán)格的滲透壓標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定的導(dǎo)電率、高標(biāo)準(zhǔn)的純凈度以及對儀器管道和閥路無腐蝕作用。因此溶血劑、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠配套產(chǎn)品。
7.首先必須明確,迄今為止,世界上無論多*的血細(xì)胞分析儀,進(jìn)行的白細(xì)胞分類都只是一種過篩手段,并不能*取代人工鏡檢分類。要堅(jiān)決糾正有些單位用了血細(xì)胞分析儀就丟掉鏡檢的錯誤思想。
8.血液分析必須建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制制度,才能保證結(jié)果的可靠性。
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