流式細(xì)胞儀對細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置,它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把細(xì)胞亞群從中分選出來。
流式細(xì)胞儀主要由四部分組成,它們分別是流動(dòng)室和液流系統(tǒng)、激光源和光學(xué)系統(tǒng)、光電管和檢測系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)。
流動(dòng)室和液流系統(tǒng)
流動(dòng)室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學(xué)玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。設(shè)計(jì)和制作均很精細(xì),是液流系統(tǒng)的心臟。
激光源和光學(xué)系統(tǒng)
經(jīng)特異熒光染色的細(xì)胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光;激光器又以氬離子激光器為普遍,也有配和氪離子激光器或染料激光器。光源的選擇主要根據(jù)被激發(fā)物質(zhì)的激發(fā)光譜而定。
光電管和檢測系統(tǒng)
經(jīng)熒光染色的細(xì)胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號而進(jìn)行測量的。光電倍增管(PMT)最為常用。PMT的響應(yīng)時(shí)間短,僅為ns數(shù)量級;光譜響應(yīng)特性好,在200~900nm的光譜區(qū),光量子產(chǎn)額都比較高。
計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)
經(jīng)放大后的電信號被送往計(jì)算機(jī)分析器。多道的道數(shù)是和電信號的脈沖高度相對應(yīng)的,也是和光信號的強(qiáng)弱相關(guān)的。對應(yīng)道數(shù)年縱坐標(biāo)通常代表發(fā)出該信號的細(xì)胞相對數(shù)目。多道分析器出來的信號再經(jīng)模-數(shù)轉(zhuǎn)換器輸往微機(jī)處理器編成數(shù)據(jù)文件,或存貯于計(jì)算機(jī)的硬盤和軟盤上,或存于儀器內(nèi)以備調(diào)用。
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