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如何用凱氏定氮儀檢測大米蛋白質(zhì)

   2020年06月24日 13:24  
  蛋白質(zhì)含量是大米品質(zhì)的指標(biāo)之一。常用的檢測蛋白質(zhì)含量的凱氏定氮儀一般用于檢測大豆、小麥和乳制品。凱氏定氮儀應(yīng)該怎么檢測大米的蛋白質(zhì)含量呢?
 
  試劑:
 
  鹽酸、氫氧化鈉、濃硫酸、硼酸、甲基紅:分析純
 
  溴甲酚綠:指示劑
 
  尿素:99.9%
 
  全麥粉粗蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
 
  銅催化劑:4.5 g K2SO4+0.5 g CuSO4﹒5H2O/片
 
  試劑配置:
 
  1.鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.1 mol/L) 按GB/T 601-2016配置及標(biāo)定。
 
  2.氫氧化鈉溶液(400 g/L) 稱取4000 g氫氧化鈉溶于水,冷卻后稀釋至10 L。
 
  3.硼酸吸收溶液(含溴甲酚綠和甲基紅指示劑):
 
  (1) 1%硼酸:將100 g硼酸溶于10 L純水中。
 
  (2) 0.1%溴甲酚綠溶液:0.1 g溴甲酚綠溶于100 mL95%乙醇中。
 
  (3) 0.1%甲基紅溶液:0.11 g甲基紅溶液100 mL溶于 95%乙醇中。
 
  (4)在10L1%的硼酸溶液中加人100 mL1%溴甲酚綠和70 mL 1%甲基紅溶液混勻。
 
  試驗(yàn)方法
 
  1.樣品制備 用中藥粉碎機(jī)粉碎大米,并過100目篩。
 
  2.單因素試驗(yàn) 參考GB 5009.5- 2016及定氮儀簡報(bào),用消化爐消化樣品,全自動凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)。以蛋白質(zhì)含量為指標(biāo),分別考察樣品質(zhì)量、濃硫酸添加量、消化溫度、消化時(shí)間4個(gè)因素對大米蛋白質(zhì)測定值的影響。
 
  3.正交試驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果選取合理水平設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)。
 
  4.精密度及準(zhǔn)確度試驗(yàn) 稱取6個(gè)平行樣品進(jìn)行精密度試驗(yàn),稱取3個(gè)平行樣品,加入尿素純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn),同時(shí)利用全麥粉粗蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)考察準(zhǔn)確度。
 
  5.數(shù)據(jù)處理試驗(yàn) 數(shù)據(jù)用SPSS數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析并進(jìn)行Duncan多重比較。

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