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Human TGF-beta1 ELISA Kit

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Human TGF-beta1 ELISA Kit采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人 TGF-β1 單克隆抗體預包被在高 親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經過孵育,樣本 中存在的 TGF-β1 與固相抗體和檢測抗體結合。

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Human TGF-beta1 ELISA Kit檢測原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人 TGF-β1 單克隆抗體預包被在高 親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經過孵育,樣本 中存在的 TGF-β1 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標 記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與 樣本中 TGF-β1 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定 吸光度值。

Human TGF-beta1 ELISA Kit樣本采集與貯存

細胞培養(yǎng)上清

離心沉淀之后即刻檢測,或者分裝,-20℃及以下貯存。避免反復凍融。 注意: 細胞培養(yǎng)基中的動物血清可能含有高濃度的潛隱 TGF-β1。為了獲得的實驗結果, 在 TGF-β1 測定試驗中使用不含動物血清的細胞培養(yǎng)基。如果使用了含有動物血清的細胞培養(yǎng)基, 應該設立適當的對照,確定 TGF-β1 的基準濃度。

 

血清樣本

血清分離管采集血清,室溫凝集 30 分鐘。2 - 8℃放置過夜,以便*釋放 TGF-β1。1000 g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測,或者分裝,-20℃及以下貯存。避免反復凍融。 尿液樣本 無菌收集晨尿中段,1000 g 離心 10 分鐘除雜。即刻檢測,或者分裝,-20℃及以下貯存。避 免反復凍融。 注意:未激活的尿液樣本在 24 小時之內,不論是冷藏還是冷凍,表現 TGF-β1 濃度降低。樣本的貯存條件和貯存期盡量保持*。

 

血漿樣本

EDTA 作為抗凝劑,采血后 30 分鐘之內,1000 g 離心 15 分鐘收集血漿。推薦再增加一次離心, 2 - 8℃,10000 g 離心 10 分鐘,*的去除血小板。即刻檢測,或者分裝,-20℃及以下貯存。避免反復凍融。 血小板顆粒中 TGF-β1 的釋放取決于血小板的活化。因此,測定 TGF-β1 外周水平,應該收集 貧血小板的血漿樣本,值得注意的是,臨床實驗室收集血漿樣本的很多操作規(guī)范(美國臨床實驗 室標準委員會),都沒有*的去除血漿樣本中的血小板。這就導致因血小板活化釋放 TGF-β1, 造成實驗結果的變異和不可重復。推薦的血漿樣本收集步驟,zui小化因血小板脫顆粒釋放 TGF-β1 所帶來的影響。然而,即使是的操作規(guī)范,也不能*去除某些血小板偶然脫顆粒。 注意:在分析前,冷凍樣本應該緩慢的恢復至室溫,輕柔的混勻。 

 

Human TGF-beta1 ELISA Kit靈敏度: 人 TGF-β1 的zui低可檢測濃度為 3.36 pg/ml。 10 個零標準品濃度 OD 的平均值加上兩倍 SD,計算zui低可檢測濃度。 

 

 

 

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