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TG1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞

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TG1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 南京賽泓瑞生物在感受態(tài)細(xì)胞的研發(fā)方面,實(shí)力雄厚,擁有了克隆、表達(dá)、酵母和農(nóng)桿菌4大類,共計(jì)百余種感受態(tài)細(xì)胞。在電擊感受態(tài)方面,擁有了大腸桿菌 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞和農(nóng)桿菌電擊感受態(tài)種類,*提高了客戶在轉(zhuǎn)基因以及文庫(kù)構(gòu)建方面的成功率。

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TG1 Electroporation-Competent Cell

TG1 電擊感受態(tài)細(xì)胞基因組:
[F?  traD36 proAB lacIqZ M15] supE thi-1    (lac-proAB)    (mcrB-hsdSM)5(r –m –)
K    K
TG1 電擊感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說(shuō)明:

TG1 電擊感受態(tài)細(xì)胞只能用于電擊轉(zhuǎn)化,不能用于熱激轉(zhuǎn)化。TG1 來(lái)源于 E.coliK-12 菌株,是目前生 長(zhǎng) 速度快的克隆用大腸桿菌菌株,在平板上 37℃,7 h 可見(jiàn)克隆。主要的噬菌體展示用菌株,同時(shí)也 可用 于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZ M15 的存在使其可以用于藍(lán)白斑篩選等實(shí)驗(yàn);但不含核酸酶 endA1 突 變,體 內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)*使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內(nèi)大量的核酸酶。
-CMbio-TG1 電擊感受態(tài)細(xì)胞適用于噬菌體展示文庫(kù)的構(gòu)建,經(jīng)特殊工藝制作,pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化 效率>0.5× 1010 cfu/μg DNA。-CMbio-
TG1 電擊感受態(tài)細(xì)胞操作說(shuō)明:
1. 0.1 cm 電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上 5 分鐘,待其瀝干水分,正置 5   分鐘,使乙

醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面 0.5 cm 以方便蓋上杯蓋,冰中 靜 置 5 分鐘充分降溫。-CMbio-
2. 取-80℃保存的 TG1 電擊感受態(tài)細(xì)胞插入冰中 5 分鐘,待其融化,加入目的 DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手 EP 管底輕輕混勻,避免產(chǎn)生氣泡,立即插入冰中。-CMbio-
A.  測(cè)定轉(zhuǎn)化效率使用  1 μl 10 pg/μl 的對(duì)照質(zhì)粒 pUC19;-CMbio-
B. 對(duì)于連接產(chǎn)物,請(qǐng)用乙醇沉淀 DNA 后加入適量 TE 緩沖液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重懸, DNA 濃度不超過(guò) 100 ng/μl,體積不超過(guò) 5 μl/50 μl    感受態(tài)。-CMbio-
3. 用 200 μl 槍頭(用刀切除 0.5cm  槍尖)將感受態(tài)-DNA   混合物快速移到電擊杯中,避免產(chǎn)生氣泡,蓋上杯蓋。

4. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù):C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此為 BioRad 電轉(zhuǎn)儀*參數(shù),也可按所用 電轉(zhuǎn)儀*的參數(shù)操作),將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,電擊完成快速插入冰中。-CMbio-
5. 2 分鐘后從冰中取出電擊杯,放室溫,加入 1ml 不含抗生素的無(wú)菌 S.O.C. 培養(yǎng)基(室溫),用 1ml 槍 吹吸電擊杯底部數(shù)次混勻后,轉(zhuǎn)移到 50 ml 離心管(BD Falcon 50 ml 錐形離心管等),向離心管中 補(bǔ) 加 S.O.C. 培養(yǎng)基至  10 ml。傾斜 45 度放入搖床,37℃,225 rpm 復(fù)蘇 60    分鐘。-CMbio-
6. 5000 rpm 離心一分鐘收菌,重懸后取 100-200 μl 涂布到含相應(yīng)抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量較大, 若全部涂板請(qǐng)選用直徑 15cm 培養(yǎng)皿 2-5 個(gè))。將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng) 13-17     小時(shí)。

JM110感受態(tài)細(xì)胞其他*:

DH5α感受態(tài)細(xì)胞 *0感受態(tài)細(xì)胞 *0F′ 感受態(tài)細(xì)胞 Mach1-T1感受態(tài)細(xì)胞 T1感受態(tài)細(xì)胞 JM109感受態(tài)細(xì)胞 JM110感受態(tài)細(xì)胞 XL1-Blue感受態(tài)細(xì)胞XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞 DB3.1感受態(tài)細(xì)胞 Stbl2感受態(tài)細(xì)胞 Stbl3感受態(tài)細(xì)胞 XL10-Gold感受態(tài)細(xì)胞 TG1感受態(tài)細(xì)胞 HB101感受態(tài)細(xì)胞 SURE感受態(tài)細(xì)胞 DH10B感受態(tài)細(xì)胞 DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞 BJ5183感受態(tài)細(xì)胞BJ5183-AD-1感受態(tài)細(xì)胞 Stable感受態(tài)細(xì)胞 Turbo感受態(tài)細(xì)胞 F-DH5α感受態(tài)細(xì)胞 F-*0感受態(tài)細(xì)胞 DH5a 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 *0 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 SURE 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
BJ5183 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 BJ5183-AD-1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 DH10B 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 XL1-Blue 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 stable 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 TG1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞EPI400感受態(tài)細(xì)胞 EPI400 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞 BL21感受態(tài)細(xì)胞 BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞 BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞 BL21(AI)感受態(tài)細(xì)胞 BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞


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