LBA4404農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
LBA4404 Electroporation-Competent Cell
產(chǎn)品編碼： 保存條件： -80℃
產(chǎn)品規(guī)格:
| LBA4404 | 20×50μl |
| pCAMBIA2301（control vector） | 10ng/ul, 10ul |
LBA4404農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞基因型：
Ach5 (rif R) Ti pAL4404 (strepR) Octopine
LBA4404農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞簡要說明：
LBA4404菌株為Ach5型背景，核基因中含有篩選標(biāo)簽——*抗性基因rif，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的章魚堿型Ti質(zhì)粒pAL4404，此質(zhì)粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，pAL4404質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移）。
pAL4404型Ti質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽：strep，賦予LBA4404菌株*抗性，適用于菸草、番茄、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。開發(fā)的LBA4404電轉(zhuǎn)感受態(tài)特別適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化：經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒(size:11633bp)檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)104cfu/μg；經(jīng)pCAMBIA2301-ZH質(zhì)粒（size:40kd）檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)103cfu/μg。
LBA4404農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞操作說明:
1. 0.2cm 電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘，待其瀝干水分，正置5分鐘，使乙醇充分揮發(fā)，待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中，壓實(shí)冰面，電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋，冰中靜置5分鐘充分降溫。
- 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘，待其融化，加入1-5ug質(zhì)粒DNA（質(zhì)粒體積不大于6ul，用試劑盒抽提，雙蒸水溶解），用手管底混勻，立即插入冰中，用200ul槍頭將感受態(tài)-質(zhì)粒混合物快速移到電擊杯中，蓋上杯蓋，空管保留待用。
- 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀，設(shè)置參數(shù)：C=25uF，PC=200ohm，V=2400V（此參數(shù)為Biorad *，使用者也可按所用電轉(zhuǎn)儀*的protocol操作），將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中，電擊完成快速插入冰中，加入700ul 無抗生素的LB并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中，28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天（當(dāng)平板只含有50ug/ml kan 時(shí)，28℃培養(yǎng)48h即可；平板中同時(shí)加入50ug/ml kan，20ug/ml rif 時(shí)，需28℃培養(yǎng)60h；如果使用的平板含有50ug/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90h）。
其他*：
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞
*0 感受態(tài)細(xì)胞
*0F´感受態(tài)細(xì)胞
Mach1 T1 感受態(tài)細(xì)胞
T1 感受態(tài)細(xì)胞
JM109 感受態(tài)細(xì)胞
JM110 感受態(tài)細(xì)胞
XL1 Blue 感受態(tài)細(xì)胞
XL2 Blue 感受態(tài)細(xì)胞
DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞
Stbl2 感受態(tài)細(xì)胞
Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞
XL10 Gold 感受態(tài)細(xì)胞
TG1 感受態(tài)細(xì)胞
HB101 感受態(tài)細(xì)胞
SURE 感受態(tài)細(xì)胞
DH10B 感受態(tài)細(xì)胞
DH10Bac 感受態(tài)細(xì)胞
BJ5183 感受態(tài)細(xì)胞
BJ5183 AD 1 感受態(tài)細(xì)胞
Stable 感受態(tài)細(xì)胞
Turbo 感受態(tài)細(xì)胞
F DH5α 感受態(tài)細(xì)胞
F *0 感受態(tài)細(xì)胞
DH5a 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
*0 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
SURE 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
BJ5183 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
BJ5183 AD 1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
DH10B 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
XL1 Blue 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
stable 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
TG1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
EPI400 感受態(tài)細(xì)胞
EPI400 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
BL21 感受態(tài)細(xì)胞
BL21 DE3 感受態(tài)細(xì)胞
BL21 DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞
BL21 AI 感受態(tài)細(xì)胞
BL21 Star DE3 感受態(tài)細(xì)胞
BL21 Star DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞
BL21 CodonPlus DE3) RIPL 感受態(tài)細(xì)胞
Rosetta DE3 感受態(tài)細(xì)胞
Rosetta gami DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞
Rosetta gami B DE3 感受態(tài)細(xì)胞
Rosetta gami 2 DE3 感受態(tài)細(xì)胞
OrigamiB DE3 感受態(tài)細(xì)胞
TB1 感受態(tài)細(xì)胞
OverExpress C43 DE3 感受態(tài)細(xì)胞
Tuner DE3 感受態(tài)細(xì)胞
ER2566 感受態(tài)細(xì)胞
F BL21 DE3 感受態(tài)細(xì)胞
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞
EHA105 感受態(tài)細(xì)胞
AGL1 感受態(tài)細(xì)胞
LBA4404 感受態(tài)細(xì)胞
EHA101 感受態(tài)細(xì)胞
GV3101 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
EHA105 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
AGL1 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
LBA4404 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
EHA101 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞
Y2HGold 感受態(tài)細(xì)胞
AH109 感受態(tài)細(xì)胞
Y187 感受態(tài)細(xì)胞
EGY48 感受態(tài)細(xì)胞
NMY51 感受態(tài)細(xì)胞
